在基因功能研究与药物开发领域，精准解析基因表达调控机制是探索生命奥秘的重要一步。为满足科研工作者对高效、可靠检测工具的需求，南宫28正式推出双荧光素酶报告基因检测服务！通过国际先进的技术平台与标准化操作流程，助您快速验证启动子活性、miRNA靶向作用、信号通路调控等关键问题，让基因调控研究更精准、更高效！

反应原理

双荧光素酶报告基因检测系统使用荧光素（luciferin）和腔肠素（coelenterazine）作为底物，检测萤火虫荧光素酶（firefly luciferase）和海肾荧光素酶活性。这一双报告系统中，萤火虫荧光素酶作为报告基因，催化luciferin氧化成oxyluciferin，释放出生物荧光；而海肾荧光素酶作为内参基因，催化coelenterazine氧化成coelenteramide，同样释放生物荧光。通过荧光测定仪或酶标仪，我们可以监测荧光素酶活性的变化。

选择双荧光素酶报告基因检测的理由

双荧光素酶系统（Firefly & Renilla Luciferase）是基因调控研究的“黄金搭档”，采用双信号校正技术，可以有效消除实验误差（如细胞数量、转染效率等的干扰），显著提高数据的稳定性和灵敏度。

适用场景及服务优势

我们的服务流程可轻松完成实验方案设计、序列合成、质粒构建、转染及报告基因检测。项目结果将提供质粒及菌液，以及详尽的项目报告。

应用案例分享

双荧光素酶可以验证转录因子与启动子区的调控作用。转录因子是一种参与基因转录调控的重要因子，它的DNA结合结构域能够识别特定的基因启动子区域，进而抑制或激活基因转录。通过构建目的基因的启动子区域到报告基因载体luciferase的上游，并共转染转录因子过表达质粒，便可利用荧光素酶活来评估转录因子对启动子活性的调控效果。

常用载体及分组

常用载体包括pGL3-Basic和pGL3-Promoter，检测分组示例有：

• 转录因子NC + 启动子对照质粒 + 海肾内参质粒；
• 转录因子NC + 启动子野生型质粒 + 海肾内参质粒；
• 转录因子NC + 启动子突变型质粒 + 海肾内参质粒；
• 转录因子质粒 + 启动子对照质粒 + 海肾内参质粒；
• 转录因子质粒 + 启动子野生型质粒 + 海肾内参质粒；
• 转录因子质粒 + 启动子突变型质粒 + 海肾内参质粒。

操作流程

1. 南宫28将目的基因构建至双荧光素酶报告基因载体的上游（如pGL3-basic）。
2. 转染细胞：将荧光素酶报告质粒与内参报告质粒共转染目的细胞，通常以10:1的比例进行转染。
3. 收集细胞：在离心后，将裂解液转移至新的管中。
4. 进行双荧光素酶报告基因活性检测，分别检测萤火虫和海肾荧光素酶的活力。
5. 处理数据：计算Firefly luciferase与Renilla luciferase的比值，从而得到不同处理组的相对活性。

预期结果分析

可能得到的结果包括：

• 转录因子促进靶基因启动子区转录活性；
• 转录因子抑制靶基因启动子区的转录活性。

服务内容

立即预约，即可享受新客户优惠！自即日起至2025年3月31日，首单客户可享9折，同时获赠实验方案设计服务。无论是基础研究还是药物开发项目，南宫28的双荧光素酶报告基因检测服务都将是您探索基因调控机制的强大工具。

相关产品清单

产品类别及名称包括：

• 南宫28双荧光素酶报告基因检测试剂盒
• 试剂规格：100T/1000T
• 转染试剂：HieffTrans® Liposomal Transfection Reagent
• 规格：100μL/1mL