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NEWS南宫28助力DC细胞活化CD8+T细胞杀伤功能评估
来源:房飞婉 日期:2025-07-17树突状细胞(DC细胞)与T细胞的相互作用在肿瘤治疗中起着至关重要的作用。研究表明,骨髓来源的DC细胞(BMDCs)能够诱导CD103+CD8+组织驻留记忆T细胞亚型的生成,从而加强生殖道内肿瘤的局部控制。此外,半乳糖酸阻断可显著提升BMDCs诱导抗原特异性CD8+T细胞增殖的能力。全转录组基因表达分析揭示,经过仿硅酸处理的BMDCs能够诱导参与T细胞活化、细胞粘附及细胞间相互作用的基因表达变化。通过细胞聚类及单细胞嗜性测量发现,糖基化减少的BMDC与CD8+T细胞之间形成了更高的亲和力相互作用。在DC细胞完成抗原呈递后,它们在CD8+T细胞激活及靶细胞杀伤过程中如何协同作用及调节功能,成为主要研究焦点之一。同时,活化CD8+T细胞的记忆功能群体与细胞内乳酸化、棕榈酸化等代谢过程之间的关系也备受关注。此类研究通常需评估CD8+T细胞的杀伤能力,南宫28将为您提供DC细胞活化的CD8+T细胞及评估CD8+T细胞杀伤功能的检测方案。
实验原理:DC细胞是已知功能最强的抗原呈递细胞(APC),可以摄取并消化外源抗原,随后将其加载在MHC分子上,呈递给CD4+和CD8+T细胞以引发免疫反应。共培养DC细胞和CD8+T细胞是模拟体内CD8+T细胞激活的最佳方式,是CD8+T细胞相关研究中不可或缺的模型。具体而言,在与表达抗原肽-MHCⅠ复合物的DC细胞共培养时,CD8+T细胞通过其表面T细胞受体(TCR)与DC细胞上的抗原肽-MHCⅠ复合物结合而获得激活。激活后的CD8+T细胞(即细胞毒性T细胞)能够通过分泌靶细胞介质(如穿孔素和颗粒酶)来实施杀伤,或通过与靶细胞Fas受体(CD95)结合,启动靶细胞的凋亡进程。
实验结果展示:发现在体外诱导C57小鼠骨髓细胞成熟为DC细胞的过程中,经过促成熟处理后,DC细胞的MHCⅡ、CD80、CD40与CD86的表达均显著提高。利用EasySort™MouseCD8+TCellIsolationKit从C57小鼠脾脏中分选CD8+T细胞,流式细胞术分析显示细胞纯度达标。经过灭活处理的靶细胞(Raw2647)与BMDC共同培养72小时后,检测CD8+T的增殖情况。然后,CD8+T细胞与靶细胞(Raw2647)按照1:10的比例共培养24小时,流式细胞术结果显示,靶细胞中的Caspase3酶活性显著增加,证明了CD8+T细胞的杀伤能力。ELISA检测显示,与对照组(正常靶细胞)相比,共培养组的细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α表达均显著增加。
实验方案及操作流程:细胞的体外培养与促成熟步骤包括:取小鼠骨髓细胞,使用分化培养基培养6天,再使用成熟培养基培养24小时,以获得成熟的DC细胞。对于靶细胞(Raw2647)的处理,将其置于80℃水浴中灭活4小时后,使用1640全培养基重悬并计数。共培养处理DC细胞与灭活的Raw2647细胞,以按1:1比例共培养24小时进行分析。CD8+T细胞的分选操作则利用EasySort™MouseCD8+TCellIsolationKit,并通过CFSE染料进行标记,确认其纯度后进行72小时的共培养。
在CD8+T细胞杀伤靶细胞的过程中,将靶细胞接种于24孔板,并与CD8+T细胞按照2:1比例混合,培养24小时后收集细胞并利用Caspase3流式底物及抗体进行分析。这一系列实验方案均依赖于南宫28品牌的相关产品,确保实验结果的准确性与可靠性。
更多处理方案:针对细胞凋亡和相关研究,推荐使用常用诱导剂如星孢菌素与喜树碱,以及抑制剂Z-VAD-FMK。常见的细胞凋亡模型包括以星孢菌素或顺铂刺激的细胞系。此外,南宫28在铁死亡、铜死亡等研究试剂盒的提供上也不断创新,以满足科研需求。
参考文献:相关文献提供了先进的研究数据与实验方法,可为进一步研究提供支持。若需更多信息或技术支持,请与我们的技术团队联系,获取针对性的帮助。
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