在生物医疗的广袤领域中，神经退行性疾病无疑是最具挑战性和引人关注的课题之一。这类疾病，如同潜伏在大脑深处的“隐形杀手”，悄然侵蚀着患者的神经细胞，导致了一系列痛苦的症状，包括记忆衰退、运动功能障碍、认知能力下降以及情绪波动。这些症状无不刺痛着患者及其家庭的心灵。

目前，神经退行性疾病(NDDs)包括阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)、肌萎缩侧索硬化症(ALS)和亨廷顿病(HD)。这些疾病的一个共同特点是错误折叠的蛋白质异常聚集在神经细胞中，导致神经元功能丧失甚至死亡。亨廷顿病作为这些疾病的“典型代表”，因其特有的单基因显性遗传而显得尤为特殊。这种疾病通常会造成患者不自主运动、认知障碍、精神行为问题，甚至体重持续下降，确诊后生存时间往往仅为15-20年，而目前的治疗手段尚不能根治，现有药物仅能部分缓解症状。因此，早期诊断和精确量化mHtt蛋白成为延缓病情进展的关键所在。

传统检测方法（如免疫组化和滤膜捕获）在灵敏度、操作便利性以及动态监控蛋白形态变化方面存在局限，严重阻碍了相关疾病机制的研究及新药的开发。在亨廷顿病中，亨廷顿蛋白(mHtt)的可溶性单体和聚集态纤维在病程发展中彼此交替：早期的可溶性mHtt可能具有毒性，促进神经元损伤，而聚集态的mHtt虽然形成包涵体，但其毒性仍然存在争议。传统技术难以精准区分这两种形态，也无法在微量样本中同时定量分析，从而使得关键的病理机制长期处于未知状态。

TR-FRET双重免疫分析方法

TR-FRET技术基于荧光共振能量转移（Förster Resonance Energy Transfer, FRET），通过对抗原进行标记抗体检测。该方法依赖稀土离子荧光团供体和受体之间的能量转移，能够产生特定的TR-FRET信号。这项技术的优势在于其高灵敏度、特异性、快速检测能力以及对小体积样本的适应性，且具备多重检测潜力。

在mHtt检测中，研究采用了2B7和MW1抗体对，专门针对mHtt的N端表位。MW1能够识别扩展的polyQ序列，当mHtt聚集时，该表位被遮盖，从而导致TR-FRET信号的丧失。关于聚集型mHtt的检测，使用了4C9和MW8抗体对，这些抗体可以在聚集物中找到多个结合位点，产生TR-FRET信号。这种设计有效规避了传统方法的表位遮蔽问题，仿佛为蛋白动态过程装上了“实时监控探头”。

技术优势

此方法实现了在5微升样本中同步检测可溶性与聚集型mHtt，展现出超高的灵敏度，能精确识别低至300kDa的可溶性片段和950kDa的聚集态复合物。同时，它揭示了疾病进程中可溶性mHtt减少与聚集态增加之间的负相关关系。在亨廷顿小鼠模型中，研究发现小脑与海马的聚集速率低于纹状体，表明这些脑区的病理差异。此外，在睾丸等高增殖组织中，发现可溶性mHtt含量高但无聚集，这对“聚集即毒性”的传统观念形成了挑战。这一发现为开发靶向可溶性mHtt或抑制聚集的治疗策略提供了重要的工具。

南宫28的贡献

TR-FRET技术的成功实施离不开高性能酶标仪的支撑，南宫28的SpectraMax iD5具有多种功能，包括荧光、发光和光吸收等基本检测能力，同时支持FRET、TR-FRET、BRET等共振能量转移技术。该仪器的独特优势体现在多通道检测、超微量分析和自动化兼容性，能够高效低成本地推动药物研发。对于科研人员而言，这项技术不仅是揭示退行性疾病之谜的“钥匙”，更是推动精准医疗实施的重要工具。未来，TR-FRET有望成为阿尔茨海默症、帕金森病等相关疾病研究的标准配置。

前景展望

亨廷顿研究的技术突破彰显了创新对生命科学的深刻影响。TR-FRET技术凭借其灵敏、高效及多维分析的特点，为神经退行性疾病的机制研究与治疗开发开辟了新路。也许在不久的将来，我们不仅能够“看到”蛋白质的异常聚集，更能通过精准干预，为病情发展按下“暂停键”。